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　　細(xì)胞培養(yǎng)板：如何判斷細(xì)胞是否貼壁成功?

　　使用低吸附細(xì)胞培養(yǎng)板時，細(xì)胞貼壁成功的判斷標(biāo)準(zhǔn)與常規(guī)培養(yǎng)板不同，需結(jié)合以下方法綜合評估：

　　1. 顯微鏡觀察法

　　貼壁狀態(tài)?：低吸附培養(yǎng)板設(shè)計為抑制細(xì)胞貼壁，若細(xì)胞仍能貼壁，說明表面處理可能失效或細(xì)胞類型特殊。正常情況應(yīng)為細(xì)胞懸浮生長?。

　　形態(tài)特征?：活細(xì)胞應(yīng)透亮有光澤，死細(xì)胞暗淡無光且膜碎裂?。

　　2. 臺盼藍(lán)染色法

　　原理?：活細(xì)胞膜完整，排斥臺盼藍(lán)(無色);死細(xì)胞膜通透性增加，被染成藍(lán)色?。

　　操作?：染色后3分鐘內(nèi)觀察，超時可能導(dǎo)致活細(xì)胞誤染。

　　3. 培養(yǎng)液狀態(tài)

　　清澈度?：培養(yǎng)液應(yīng)清澈，無渾濁、雜質(zhì)或大量細(xì)胞碎片?。

　　懸浮細(xì)胞比例?：若為貼壁細(xì)胞，應(yīng)有少量懸浮細(xì)胞(微量);若為懸浮細(xì)胞，應(yīng)均勻分散?。

　　4. 細(xì)胞活性檢測

　　貼壁分子?：活細(xì)胞表面存在功能性黏附分子(如糖蛋白)，死細(xì)胞則失活或降解?。

　　注意事項

　　低吸附培養(yǎng)板特性?：專為懸浮細(xì)胞設(shè)計，若細(xì)胞貼壁，需檢查培養(yǎng)板是否適用或處理是否失效?。

　　避免誤判?：細(xì)胞膜邊緣清晰度非金標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)以膜完整性為準(zhǔn)?。

　　若需進(jìn)一步確認(rèn)，可結(jié)合臺盼藍(lán)染色和顯微鏡觀察，確保細(xì)胞活性與培養(yǎng)板適用性匹配。

　　注：供科研使用，以上資料供參考。

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